全自动密闭式组织脱水机的使用改进

维普资讯 http://www.cqvip.com 理兰苤壹２００２年６月第３１卷第３期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｐａｔｈｏｌ，Ｊｕｎｅ　２００２，Ｖ０１　３１，Ｎ０．３　．技术交流．　全自动密闭式组织脱水机的使用改进　吉耘　马恒辉　孙桂勤　孟奎　周晓军　全自动密闭式组织脱水机以其卓越的性能和良好的处　理效果，特别是安全、高效，将逐渐被各级医院病理科广泛使　用。我科自１９９７年使用全自动密闭式组织脱水机以来，标　标本处理适当，组织切片（４　Ｆｍ厚）柔软、厚薄均匀、染　色鲜艳（图ｌ，２）。个别组织因取材较厚或菲薄者除外。传　统的组织处理方法多为人工处理，制作周期较长，尤其不适　于大批量处理。而一般的自动组织脱水机虽然克服了人工　处理的不足，省时、省力，但由于缺乏必要的安全保护装置，　一本的处理效果明显改观，切片质量显著提高。　一、材料与方法　１．仪器和设备：（１）进口全自动密闭式组织脱水机，附不　锈钢脱水篮２只，分别可容１５０个包埋盒。（２）塑料包埋盒。　２．试剂：（１）ＡＡＦ固定液：７０％乙醇８５　ｍｌ，冰乙酸５　ｍｌ，　４％甲醛液ｌ０　ｍｌ。（２）９５％乙醇，（３）无水乙醇，（４）硬脂酸，　（５）５８—６０ｏＣ熔点石蜡。　３．处理过程：新鲜组织取材后，放人写有检验号码的塑　料包埋盒内，置于ＡＡＦ液中预固定，等取材结束后统一人脱　水机处理。大标本取材范围约为２．０　ｃｍ×２．０　ｃｍ×０．３　ｃｍ；　旦遇到停电或机器故障，常易导致标本干枯、收缩，造成无　法弥补的损失。而全自动密闭式组织脱水机因其独特的以　人为本的智能化设计理念，周到完善的处理程序，极大的保　证了组织处理的安全性。　虽然使用普通脱水机的经验国内已有报道＿２　Ｊ，但是使用　此类大容量高效率全自动密闭式组织脱水机的文章较少报　道。在工作中，我们通过摸索实践，大胆创新，采用新鲜标本　直接取材的方法，充分利用脱水机的程序，以缩短制片周期；　同时，在组织透明方面，用硬脂酸替代二甲苯，达到透明作　用。这与以往报道有所不同。我们的经验有以下几点。　小标本如内窥镜及各种活检组织、皮肤等视其大小，可直接　用擦镜纸或尼龙丝小袋包好置于塑料包埋盒内。所有取完　材的标本，人脱水机进行处理，处理时间约为１５　ｈ左右。其　后经过（１）补充固定：２０％甲醛（实际含甲醛量８％）两道，各　１．５　ｈ，温度为５０￣Ｃ，设置加压、搅拌。（２）梯度乙醇脱水：　９５％乙醇直接脱水４遍，前两遍各４５　ｍｉｎ，搅拌。第３遍ｌ　ｈ，　搅拌。第４遍ｌ　ｈ，设置加压、搅拌；无水乙醇４遍，其设置情　况同９５％乙醇。（３）透明与浸蜡：采用硬脂酸与石蜡混合液　进行透明与浸蜡。第一缸硬脂酸与石蜡比例为３：２，第二缸　硬脂酸与石蜡比例为２：３。透明加浸透各ｌ　ｈ，温度为６５￣Ｃ、　１．为保证标本有良好的固定，我们采用ＡＡＦ液作为预　先固定剂。ＡＡＦ固定液对核蛋白及糖原的保存尤为理想，且　穿透性较好。改善了固定后的组织学图像。乙酸可减轻组　织的硬化，使细胞核的边界清晰＿３　Ｊ。特别是对富有细胞的组　织，例如；淋巴结、胃镜、鼻咽部活检组织等均能产生良好的　作用。　２．为保证标本固定充分，脱水程序中增加了补充固定，　因市售甲醛浓度可能不佳，故将甲醛浓度调整为２０％，效果　良好。　３．在脱水过程中，为防止标本在乙醇中脱水过度，一般　只在９５％乙醇和无水乙醇的最后一遍设置加压、搅拌。　设置加压、搅拌。后两缸为纯蜡浸透，温度为６５℃，设置加　压、搅拌【　。　二、结果和讨论　图１　乳腺伴神经内分泌分化的浸润性导管癌，示切片完整，组织结构和细胞形态清晰ＨＥ×４００　ＨＥ×１００　图２　胸腺大细胞间变性淋巴瘤　示切片完整，染色均匀，胞核、胞质清晰作者单位：２１０００２南京军区南京总医院病理科　维普资讯 http://www.cqvip.com 堡　墨堂苤查　堡　旦塑　鲞箜　朔Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｐａｔｈｏｌ，Ｊｕｎｅ　２００２，Ｖｏ１　３１，Ｎｏ．３　处理槽底部有一个圆形漏孔，整个处理过程中的所有液体都　要通过它作用于标本。因此尤其要注意保护，切勿使之堵　４．硬脂酸代替二甲苯，作用相当于透明。组织处理后物　理性质较好，切片时组织柔软、厚薄均匀。同时为了保证透　明浸蜡的充分，在此过程中均使用了加压、搅拌。但必须注　意蜡的温度不可过高，以６０～６５℃为佳。　５．机器的保养与试剂更换：（１）一般约２０　ｄ左右更换试　剂。两道固定液必须全部换新。梯度乙醇只将第１缸９５％　塞。在每次取出标本后，均需用软布将处理槽内残存的蜡拭　净。否则会使清洗液中的二甲苯呈乳糜状，达不到清洗的目　的，影响下一期脱水并缩短清洗液的使用寿命。（４）活性炭　用久后可取出放于干燥箱内烘干或放置通风干燥处一段时　间后继续使用。　参　考　文　献　１　Ｃａｒｓｏｎ　ＦＬ．Ｈｉｓｔｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ａ　ｓｅｌｆ－ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｌ　ｔｅｘｔ．２ｎｄ　ｅｄ．Ｃｈｉｃａｇｏ　Ａｍ州ｃａｎ　ｓｏｃｉｅｔｙ　ｏｆ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｓｔｓ　ｐｒｅｓｓ．１９９６．２５－４２．　乙醇废弃，将后面的乙醇顺序前移，将最后一缸无水乙醇更　新。用第２缸的蜡液将前面缺失的蜡液补足。只在最后一缸　添加融化好的纯蜡。在含有硬脂酸的蜡液中按比例添加硬　脂酸少许。用久的蜡液应彻底更换。（２）机器的清洗：清洗　程序中先经过１０　ｍｉｎ、６５℃的预热，然后经过９遍二甲苯、５　遍无水乙醇的循环清洗。为了清洗的质量，清洗液要经常更　２李泳，刘洋，吴小青．全自动密闭式组织脱水机操作方法的改进　诊断病理学杂志，２０００，７：７０．　３周序珑．常用固定液．见：汪谦，主编．现代医学实验方法．北京　人民卫生出版社，１９９７．１０９—１１０．　（收稿日期：２００１．０８—３０）　新。一般１０　ｄ左右更换一次。清洗后，必须用软布将处理　槽内部擦拭干净。尤其应注意脱水机盖子上皮封条的清洁，　若皮封条上有蜡将会影响处理槽的密封性。（３）脱水机组织　（本文编辑：霍临明）　．读者．作者．编者．　关于参考文献的著录　霍临明　文后参考文献是现代科技论文的重要组成部分，是自己　位加以标注序号。如文内列出文献作者名，则序号标在被引　工作的基础，也是对正文的补充和佐证，反映了文稿的科学　依据和著者尊敬他人研究成果而向读者提供文中引用有关　资料的出处，或为了节约篇幅和叙述方便，提供在论文中提　及而没有展开的有关内容的详尽文本＿ｌ　Ｊ。当前国际期刊界　都非常重视文献的引用量，被引用最多的论文内容往往是同　期最热点研究课题，而其论文被引用次数最多的学者是最受　推崇的学者。就科技期刊而言，所载论文被引用次数越多的　期刊越具影响力。我国文献工作标准化技术委员会已根据　国际标准化工作发展趋势，制订出国家标准——ＧＢ７７１４—８７　作者姓名处；如仅叙述文献内容，不列出作者，则序号标在引　用内容结束处。因文后参考文献的著录形式比较复杂，具体　标注时应查阅ＧＢ７７１４．８７的规定，该规定未涉及之处，采用　ＩＳ０６９０和ＩＳ０６９０．２的有关规定。　４．在著录文献时比较容易出现的错误有：（１）打印、外文　拼写错误，这是最常见的错误，只要细心又是最易于避免的。　（２）文献引用时，一律采用作者的姓在前，名字的词头缩写在　后。但经常有作者颠倒了外国学者的姓与名，造成文献引用　错误。（３）出于疏忽或一些原因而故意不引用某些文献，影　响了论文质量。（４）所引文献的描述甚至观点与著者在文内　的不同，这是严重影响论文质量的引用错误。究其原因可能　是阅读理解有误而导致的。所以，要做好研究，写好科技论　文，就一定要学好本专业的基础理论、熟悉本专业的发展，并　切实提高外文水平。（５）不能按期刊稿约要求完整著录文　《文后参考文献著录规则》，明确规定我国的科技期刊采用国　际上通行的“顺序编码制”和“著者一出版年制”。根据以往编　辑工作经验，我们认为著录参考文献时主要应注意以下　问题。　１．被列文献应是研究者从众多参考过的文献中精心挑　选出的、与论文主要内容密切相关的、著者亲自阅读过的、发　表在正式出版物上或其他有关档案资料，如专利等文献上。　尽量避免用摘要作参考文献。　２．著录时必需对照被引文献仔细核实，确保著录无误。　一献，在引用时漏著、空缺某些内容，如未按要求列出３名作　者，１名作者加“等（ｅｔ　ａ１）”，甚至空缺作者；缺期刊名、页码　等。引用书籍时漏标章节作者和（或）章节题目、主编姓名、　出版地、出版商、年份、页码等。（６）专业术语用缩写代替　全称。　旦著录有误，造成读者无法参考时，读者可能会对作者论　文的科学性产生不信任感，而放弃对该论文的引用，就是作　者的损失了。　参　考文　献　３．与书籍文后的参考文献不同，期刊文后参考文献不仅　要求按在文内的出现顺序在文后编码，而且要在文内相应部　１金德年．科技论文编写格式．见：王立名，主编．科学技术期刊　编辑教程．北京：人民军医出版社，１９９５．５１．　（收稿日期：２００２—０３．２０）　作者单位：１００７１０北京，中华医学会杂志社　（本文编辑：齐文安）